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P2Y12 - 小胶质细胞的一种特定标记物

 

概览

SYSY抗P2Y12抗体:提高免疫组织化学的精确性

在SYSY,我们已开发了一种高度特异性的小鼠抗-P2Y12单克隆抗体(cat. no. 476 011),它提供了优越的信噪比,并可被稀释至1:10000。该抗体适用于各种组织制备方法,包括石蜡包埋组织(FFPE, IHC-P)(图1),标准经PF固定的组织(IHC)和甲醇后固定的新鲜冷冻组织(IHC-Fr)(图2)。值得注意的是,我们的抗体优于许多现有的针对小胶质标记物的抗体,特别是在经甲醇后固定的样品中。


为了提高我们的多重染色产品,我们已扩大了我们的产品范围,包括嵌合重组抗体。这包括重组兔抗-P2Y12 (cat. no. 476 008)和重组豚鼠抗-P2Y12 (cat. no. 476 308)抗体。我们所有的P2Y12抗体都是单克隆的,这确保了批次间的最小变异。有关我们重组抗体的更多信息,请访问我们的专题用于科学研究的重组抗体

 

图1:使用小鼠抗-P2Y12 抗体 (cat. no. 476 008, 稀释比例1:5000, DAB),对经PFA固定、石蜡包埋的小鼠大脑皮层切片进行间接免疫染色。细胞核由苏木精染色可见为蓝色。

图2:使用小鼠-抗P2Y12抗体(cat. no. 476 308,稀释比例1:5000, 绿色),对经甲醇后固定的新鲜冷冻小鼠脑切片进行间接免疫染色。细胞核由DAPI染色可见为蓝色。

 

科学背景

P2Y12受体(P2RY12)是一种Gi偶联嘌呤受体,与中枢神经系统(CNS)中的小胶质细胞功能尤其相关 (Lin et al., 2020)。该受体在监测小胶质细胞的过程和体细胞中均高度表达,并在局部中枢神经系统损伤的小胶质趋化反应中扮演着重要的角色(Haynes et al., 2006)。最近,P2Y12受体被发现集中在小胶质细胞过程和神经元细胞体之间的界面上(Cserép et al., 2020)。迄今为止,P2Y12受体是最被接受的小胶质细胞特异性标志物之一,可用于区分中枢神经系统驻留小胶质细胞与中枢神经系统相关巨噬细胞(CAMs)(图3)和浸润性单核细胞/巨噬细胞(Hashioka et al., 2022)。

图3:使用小鼠抗-P2Y12抗体(cat. no. 476 011,稀释比例1:2000, 绿色) 和兔抗-CD163 抗体 (cat. no. HS-455 003,稀释比例 1:125, 红色),对经甲醛固定的小鼠大脑皮层切片进行间接免疫染色。细胞核由DAPI染色可见为蓝色。

图4:使用豚鼠抗-P2Y12 抗体 (cat. no. 476 308, 稀释比例 1:10000, 红色) 和大鼠抗-IBA1 抗体(cat. no. 234 017,稀释比例1:500, 绿色),对经甲醛固定的APP/PS1小鼠海马体切片进行间接免疫染色。细胞核由DAPI染色可见为蓝色。

ADP(二磷酸腺苷)是ATP(三磷酸腺苷)的降解产物,是P2Y12受体的首选激动剂。ATP在正常生理活动期间或组织损伤后会从神经元和其他胶质细胞释放(Lin et al., 2020, Deitmer et al., 2006, Weilinger et al., 2023)。在小胶质细胞中,当这些细胞进入激活状态,又被称为疾病相关小胶质细胞(DAM),P2Y12受体的表达水平会下调(Keren-Shaul et al., 2017)。这种现象可以在APP-PS1转基因小鼠的淀粉样斑块周围区域观察到,这是阿尔茨海默病的一种常见模型(图4)。相反,其他小胶质细胞标志物,如IBA1、CD11b或CD11c,会在激活过程中上调。有关神经炎症的更多信息,请访问我们的特色主题大脑之战 – 神经炎症的两面性

在外周,P2Y12受体可在血小板表面表达,由于其在血小板活化、聚集和血栓形成中的关键作用,P2Y12受体已成为抗血栓药物的关键生物学靶点(Dorsam and Kunapuli 2004)。

 

产品

Cat. No. Product Description Application Quantity Price Cart
476 008P2Y12, rabbit, monoclonal, recombinant IgGrecombinant IgG
mouse specific
IHC IHC-P IHC-Fr 50 µgUS$420.00
476 011P2Y12, mouse, monoclonal, purified IgG IgG
mouse specific
IHC IHC-P IHC-Fr 100 µgUS$420.00
476 308P2Y12, Guinea pig, monoclonal, recombinant IgGrecombinant IgG
mouse specific
IHC IHC-P IHC-Fr 50 µgUS$415.00
Result count: 3
 

SYSY产品系列具有多样化的抗体选择,完全适合小胶质细胞和巨噬细胞的研究:

 

作者:Liane Wüstefeld博士
组织学部主任,主要研究方向为神经科学。作为一名组织学专家,Liane验证了我们内部开发的用于免疫组织化学(IHC)应用的抗体

 

参考文献

Cserép et al., 2020: Microglia monitor and protect neuronal function through specialized somatic purinergic junctions. PMID: 31831638

Deitmer et al., 2006: Modulation of synaptic activity in Purkinje neurons by ATP. PMID: 16527764

Dorsam and Kunapuli 2004: Central role of the P2Y12 receptor in platelet activation. PMID: 14755328

Haynes et al., 2006: The P2Y12 receptor regulates microglial activation by extracellular nucleotides. PMID: 17115040

Hashioka et al., 2022: Contribution of "Genuine Microglia" to Alzheimer's Disease Pathology. PMID: 35401156

Keren-Shaul et al., 2017: A Unique Microglia Type Associated with Restricting Development of Alzheimer's Disease. PMID: 28602351

Lin et al., 2020: The Safeguarding Microglia: Central Role for P2Y12 Receptors. PMID: 33519493

Weilinger et al., 2023: Pannexin-1 opening in neuronal edema causes initial cell death but also leads to protection via increased microglia contacts. PMID: 37742194